Thuốc thử kháng thể Oct3/4 dùng cho hóa mô miễn dịch

【Tên sản phẩm】

Kháng thể IHC -- Oct3/4

【Quy cách đóng gói】

【Mục đích sử dụng】

Dành cho IVD. Oct3/4 Thuốc thử kháng thể được dùng để định tính Oct3/4 bằng kính hiển vi trong các lát cắt mô FFPE bằng hệ thống phát hiện hóa mô miễn dịch hệ thống.

【Principle】

POU5F1 (miền POU, lớp 5, yếu tố phiên mã 1), còn được gọi là yếu tố phiên mã gắn octamer-3 (Oct-3, Otf-3), yếu tố phiên mã gắn octamer-4 (Oct-4, Otf-4) và Oct-3/4, có chức năng điều hòa và duy trì tính toàn năng ở tế bào gốc phôi và tế bào mầm nguyên thủy. Thêmkháng thể nguyên phát để liên kết với kháng nguyên trên các phần mô, và sau đó  sử dụngkháng thể thứ phát gắn nhãn HRP liên kết với kháng thể nguyên phát để tạo thành phức hợp kháng thể thứ phát -kháng thể nguyên phát -kháng nguyên. Khi dung dịch tạo màu DAB được thêm vào, HRP phản ứng với cơ chất enzyme để tạo ra sản phẩm phản ứng kết tủa màu nâu, qua đó gián tiếp chỉ ra sự hiện diện của kháng nguyên. 

【Thành phần chính】

Immunoglobulin, dung dịch pha loãng kháng thể

【Bảo quản】

Bảo quản ở 2～8℃ trong 18 tháng。

【Yêu cầu mẫu】

Mô FFPE thường được cắt thành các lát mỏng khoảng 3～5μm bằng máy cắt vi thể. Các tiêu bản này sau đó được gắn lên lam kính đã được phủ chất kết dính mô.

【Quy trình】

1. Chuẩn bị mẫu：Tẩy paraffin các tiêu bản trong xylene Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ trong 5 phút；Chuyển các tiêu bản lần lượt qua các dung dịch cồn 100%, 100%, 95%, 75% mỗi loại trong 2 phút tương ứng. Rửa các tiêu bản bằng nước khử ion trong 30 giây.

2. Chặn：Chặn hoạt tính peroxidase nội sinh bằng cách ủ các lát cắt trong dung dịch H₂O₂ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút để chặn hoạt tính peroxidase nội sinh. Rửa các tiêu bản bằng nước khử ion trong 30 giây.

3. Phục hồi kháng nguyên:Làm nóng đệm phục hồi kháng nguyên EDTA đến 100℃. Sau đó đặt các tiêu bản vào dung dịch đệm đã đun sôi và tiếp tục đun nóng trong 15~20 phút. Để nguội tự nhiên trong 30 phút. Rửa mẫu bằng đệm rửa.

4. Ủ kháng thể nguyên phát: Để ráo các tiêu bản. Thêm kháng thể nguyên phát vào mô, ủ ở nhiệt độ phòng trong 30 phút. (sử dụng dung dịch pha loãng kháng thể hoặc PBS làm đối chứng). Rửa lam kính trong PBST trong 2 lần, mỗi lần 5 phút. Nếu kháng thể thứ nhất ở dạng đậm đặc, vui lòng pha loãng đến nồng độ RTU (sẵn sàng sử dụng) theo thông tin trên bao bì. 

5. Kháng thể thứ hai: Làm ráo lam kính. Thêm kháng thể thứ hai vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 20  phút. Rửa lam kính trong PBST trong 2 lần, mỗi lần 5 phút.

6. DAB:Làm ráo lam kính. Thêm DAB vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút. Rửa sạch lam kính bằng nước khử ion.

7. Nhuộm Hematoxylin：Đổ hết nước trên lam kính. Thêm Hematoxylin vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút. Rửa sạch lam kính bằng nước. Sử dụng dung dịch axit để phân biệt. Rửa sạch lam kính bằng nước.

8. Mất nước：Mất nước lam kính trong 75%, 95%, 100% cồn trong 2 phút. Làm khô tiêu bản. Đậy mô đã nhuộm bằng lamen sử dụng keo gắn tiêu bản.

【Vị trí dương tính】

1. Vị trí dương tính: nhân tế bào.

2. Positive control: seminoma.

【Biện pháp phòng ngừa】

1. Vui lòng đọc kỹ hướng dẫn và làm quen với tất cả các thành phần của bộ kit trước khi sử dụng, tuân thủ nghiêm ngặt hướng dẫn trong quá trình vận hành.

2. KHÔNG sử dụng bộ kit hoặc bất kỳ thành phần nào của bộ kit sau hạn sử dụng của chúng.

3. Chỉ những chuyên gia đã được đào tạo mới có thể sử dụng bộ kit này. Vui lòng mặc áo choàng thí nghiệm thích hợp và đeo găng tay dùng một lần khi xử lý các thuốc thử.

4. Tránh để da, mắt và màng nhầy tiếp xúc với các hóa chất.

5. KHÔNG hút pipet bằng miệng.

6. Các thuốc thử chưa sử dụng, bộ kit đã qua sử dụng và chất thải phải được thải bỏ theo quy định của địa phương.

【Manufacturer】

Tên công ty: Xiamen Talent Biomedical Technology Co.,Ltd

Địa chỉ: Tầng 3 và Tầng 4, Tòa nhà B10, Số 2068 Đường Tây Wengjiao, Công viên Y sinh, Quận Hải Thương, Thành phố Hạ Môn, 361000 Trung Quốc

Điện thoại: +86 592 6315755            

E-mail: talent1@talentbiomedical.com                

Trang web: www.talentbiomedical.com

【Ký hiệu】