Hệ thống phát hiện IHC iVision™

Tên sản phẩm

iVision^TM Poly-HRP Kháng thể đa dòng dê kháng chuột, thỏ IgG

Quy cách đóng gói

Mục đích sử dụng

Dành cho IVD. iVision^TM Kháng thể dê kháng chuột, thỏ IgG, liên hợp peroxidase được dùng để phát hiện sắc tố các kháng nguyên mục tiêu đã phản ứng với kháng thể nguyên phát do người dùng cung cấp trên mô người. Khuyến cáo không được thay thế các thuốc thử giữa các bộ kit hoặc các số lô khác nhau.

Đặc tính hiệu suất

Các hệ thống phát hiện đã cho thấy độ nhạy cao và thể hiện sự liên kết đặc hiệu với kháng thể nguyên phát với mức độ liên kết không đặc hiệu từ tối thiểu đến không có. iVision^TM Các hệ thống phát hiện đã cho thấy tính tái lập và nhất quán trong một lần chạy duy nhất, giữa các lần chạy và giữa các lô. Các sản phẩm đã được xác định là ổn định trong khoảng thời gian được chỉ định bằng thử nghiệm thời gian thực.

Nguyên lý

Các kháng nguyên trong mô và tế bào được phát hiện trong xét nghiệm hóa mô miễn dịch (IHC) theo quy trình hai giai đoạn: sự liên kết của kháng thể nguyên phát và sự phát hiện tiếp theo của liên kết này bởi hệ thống phát hiện iVision^TM Các mô được cắt lát và gắn lên lam kính. Kháng thể nguyên phát sản xuất ở chuột sau đó được thêm vào để phản ứng với các kháng nguyên mục tiêu, tiếp theo là việc bổ sung Poly-HRP Kháng thể dê kháng chuột, thỏ IgG để phản ứng với các kháng thể nguyên phát, và cuối cùng là dung dịch cơ chất/chất tạo màu, chẳng hạn như DAB hoặc AEC, được chuyển hóa bởi peroxidase thành cặn không hòa tan. Toàn bộ quy trình tạo ra một hồ sơ hiển thị rõ ràng về vị trí của các kháng nguyên trong các phần mô hoặc trong các loại tế bào.

Thành phần chính

Kháng thể dê kháng chuột, thỏ IgG, liên hợp Peroxidase

Bảo quản

Bảo quản ở 2～8℃ trong 18 tháng.

Yêu cầu mẫu

Mô FFPE thường được cắt thành các lát mỏng khoảng 3~5μm bằng máy cắt lát vi thể. Các lát cắt này sau đó được gắn lên lam kính đã được phủ chất dính mô.

Quy trình

1. Chuẩn bị mẫu：Khử paraffin các lam kính trong xylene Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ trong 5 phút；Chuyển các lam kính lần lượt qua các dung dịch cồn 100%, 100%, 95%, 75% trong 2 phút tương ứng. Rửa các lam kính bằng nước khử khoáng trong 30 giây.

2. Khóa：Khóa hoạt tính peroxidase nội sinh bằng cách ủ các lát cắt trong dung dịch H₂O₂ 3% ở nhiệt độ phòng trong 5 phút để ức chế hoạt tính peroxidase nội sinh. Rửa các lam kính bằng nước khử ion trong 30 giây.

3. Phục hồi kháng nguyên：Đun nóng đệm phục hồi kháng nguyên EDTA đến 100℃. Sau đó đặt các lam kính vào đệm đã đun sôi và tiếp tục đun nóng trong 15～20 phút. Để nguội tự nhiên trong 30 phút. Rửa mẫu bằng dung dịch đệm rửa.

4. Ủ kháng thể thứ nhất: Làm ráo các lam kính. Thêm kháng thể thứ nhất vào mô, ủ ở nhiệt độ phòng trong 30 phút. (sử dụng dung dịch pha loãng kháng thể hoặc PBS làm đối chứng). Rửa các lam kính trong PBST 2 lần, mỗi lần 5 phút. Nếu kháng thể thứ nhất ở dạng đậm đặc, vui lòng pha loãng đến nồng độ RTU (sẵn sàng sử dụng) theo thông tin trên bao bì. 

5. Kháng thể thứ hai: Làm ráo các lam kính. Thêm iVision^TM Poly-HRP Goat anti-Mouse, Rabbit IgG kháng thể thứ hai vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 20 phút. Rửa các lam kính trong PBST 2 lần, mỗi lần 5 phút.

6. DAB：Làm ráo các tiêu bản. Thêm DAB vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút. Rửa các tiêu bản bằng nước khử ion.

7. Nhuộm Hematoxylin：Làm ráo các tiêu bản. Thêm Hematoxylin vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phútphút. Rửa các tiêu bản bằng nước. Sử dụng dung dịch axit để phân biệt. Rửa các tiêu bản bằng nước.

8. Khử nước：Khử nước các tiêu bản trong cồn 75%, 95%, 100% trong 2 phútphút. Làm khô các tiêu bản. Đậy mô đã nhuộm bằng lamen sử dụng chất gắn.

Kết quả Kỳ vọng

Sử dụng đúng thuốc thử này sẽ mang lại kết quả nhuộm đậm, rõ ràng tại các vị trí kháng nguyên ở cả mẫu vật và mẫu đối chứng dương tính. Bất kỳ sự sai lệch nào so với các kết quả kỳ vọng này đều phải khiến người dùng đặt câu hỏi về kết quả và tham khảo ý kiến dịch vụ kỹ thuật hoặc nhà phân phối địa phương để được hỗ trợ.

Biện pháp phòng ngừa

1. Vui lòng đọc kỹ hướng dẫn và làm quen với tất cả các thành phần của bộ kit trước khi sử dụng, tuân thủ nghiêm ngặt hướng dẫn trong quá trình thao tác.

2. KHÔNG sử dụng bộ kit hoặc bất kỳ thành phần nào của bộ kit sau khi hết hạn.

3. Chỉ những chuyên gia được đào tạo mới có thể sử dụng bộ kit này. Vui lòng mặc áo blouse phòng thí nghiệm phù hợp và đeo găng tay dùng một lần khi xử lý các thuốc thử.

4.Tránh để da, mắt và màng nhầy tiếp xúc với các hóa chất.

5.KHÔNG hút mẫu bằng miệng.

6. Các thuốc thử chưa sử dụng, bộ kit đã dùng và chất thải phải được xử lý theo quy định của địa phương.

MNhà sản xuất

Tên công ty: Xiamen Talent Biomedical Technology Co.,Ltd

Địa chỉ: Số. Tầng 3 và 4, Tòa nhà B10, Số 2068 Phố Wengjiao Tây, Khu Công nghiệp Y sinh, Quận Hải Thương, Thành phố Hạ Môn, Trung Quốc 36100

Điện thoại: +86 592 6315755            

Email: tlsw@talentbiomedical.com                

Trang web: www.talentbiomedical.com

Ký hiệu