Thuốc thử kháng thể HIF-1α dùng cho hóa mô miễn dịch

【Tên sản phẩm】

Káng thể IHC --HIF-1α

【Quy cách đóng gói】

【Mục đích sử dụng】

Dùng cho IVD. HIF-1α Thuốc thử kháng thể được dùng để định tính HIF-1α bằng kính hiển vi trong các lát cắt mô FFPE bằng hệ thống phát hiệnhóa mô miễn dịch.

【Nguyên lý】

Yếu tố cảm ứng thiếu oxy 1 (HIF1) là một yếu tố phiên mã dị hai phân đóng vai trò quan trọng trong phản ứng của tế bào đối với tình trạng thiếu oxy (1). Phức hợp HIF1 bao gồm hai tiểu đơn vị, HIF-1α và HIF-1β. HIF-1α đóng vai trò thiết yếu trong quá trình mạch hóa phôi thai, sự tăng sinh mạch máu khối u và sinh lý bệnh của bệnh thiếu máu cục bộ. Thêm kháng thể sơ cấp để liên kết với kháng nguyên trên lát cắt mô, sau đó sử dụng kháng thể thứ cấp gắn nhãn HRP liên kết với kháng thể sơ cấp để tạo thành phức hợp  kháng thể thứ cấp-kháng thể sơ cấp-kháng nguyên. Khi thêm dung dịch hiện màu DAB, HRP sẽ phản ứng với giá thể enzym để tạo ra sản phẩm phản ứng màu nâu không hòa tan, cho thấy sự tồn tại của kháng nguyên một cách gián tiếp. 

【Thành phần chính】

Immunoglobulin, chất pha loãng kháng thể

【Bảo quản】

Bảo quản ở 2～8℃ trong 18 tháng。

【Yêu cầu mẫu】

Mô FFPE thường được cắt thành các lát mỏng 3～5μm bằng máy cắt vi thể. Các lát cắt này sau đó được gắn lên lam kính đã được phủ chất bám dính mô.

【Quy trình】

1. Chuẩn bị mẫu：Tẩy paraffin các lam kính trong xylene Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ trong 5 phút；Chuyển các lam kính lần lượt qua cồn 100%, 100%, 95%, 75% tương ứng trong 2 phút. Rửa sạch lam kính bằng nước khử ion trong 30 giây.

2. Phủ block：Ức chế hoạt tính peroxidase nội sinh bằng cách ủ các lát cắt trong dung dịch H₂O₂ 3% ở nhiệt độ phòng trong 5 phút để ức chế hoạt tính peroxidase nội sinh. Rửa các lam kính bằng nước khử ion trong 30 giây.

3. Phục hồi kháng nguyên：Đun đệm phục hồi kháng nguyên EDTA đến 100℃. Sau đó đặt các lam kính vào đệm đun sôi và tiếp tục đun trong 15～20 phút. Để nguội tự nhiên trong 30 phút. Rửa mẫu bằng đệm rửa.

4. Ủ kháng thể nguyên phát: Để ráo các phiến kính. Thêm kháng thể nguyên phát vào mô, ủ ở nhiệt độ phòng trong 30 phút. (sử dụng chất pha loãng kháng thể hoặc PBS làm đối chứng). Rửa các phiến kính trong PBST 2 lần, mỗi lần 5 phút. Nếu kháng thể nguyên phát là dạng đậm đặc, vui lòng pha loãng thành dạng RTU (sẵn sàng sử dụng) theo thông tin trên bao bì. 

5. Kháng thể thứ phát: Để ráo các phiến kính. Thêm kháng thể thứ phát vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 20 phút. Rửa tiêu bản trong PBST 2 lần, mỗi lần 5 phút.

6. DAB：Làm ráo tiêu bản. Thêm DAB vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút. Rửa tiêu bản bằng nước khử ion.

7. Nhuộm Hematoxylin：Làm ráo tiêu bản. Thêm Hematoxylin vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút. Rửa tiêu bản bằng nước. Sử dụng dung dịch axit để phân biệt. Rửa tiêu bản bằng nước.

8. Khử nước：Khử nước tiêu bản trong cồn 75%, 95%, 100% trong 2 phút. Làm khô tiêu bản. Đậy mô đã nhuộm bằng lamen sử dụng keo gắn kính.

【Vị trí dương tính】

1. Vị trí dương tính： tế bào chất/nhân.

2. Chứngdương: ung thư vú.

【Thận trọng】

1. Vui lòng đọc kỹ hướng dẫn và làm quen với tất cả các thành phần của bộ kit trước khi sử dụng. Tuân thủ nghiêm ngặt hướng dẫn trong quá trình vận hành.

2. KHÔNG sử dụng bộ kit hoặc bất kỳ thành phần nào của bộ kit sau hạn sử dụng.

3. Chỉ những chuyên gia được đào tạo mới có thể sử dụng bộ kit này. Vui lòng mặc áo blouse phù hợp và đeo găng tay dùng một lần khi xử lý các thuốc thử.

4. Tránh để da, mắt và màng nhầy tiếp xúc với các hóa chất.

5. KHÔNG hút bằng miệng.

6. Các thuốc thử không sử dụng, bộ kit đã qua sử dụng và chất thải phải được xử lý theo quy định tại địa phương.

【Nhà sản xuất】

Tên công ty: Xiamen Talent Biomedical Technology Co.,Ltd

Địa chỉ: Tầng 3 và Tầng 4, Tòa nhà B10, Số 2068 Đường Wengjiao Tây, Công viên Y sinh, Quận Hải Thương, Thành phố Hạ Môn, 361000 Trung Quốc

Điện thoại: +86 592 6315755            

Email: talent1@talentbiomedical.com                

Trang web: www.talentbiomedical.com

【Ký hiệu】