Thuốc thử kháng thể WT1 dùng cho hóa mô miễn dịch

【Tên sản phẩm】

WT1 Thuốc thử kháng thể——Kháng thể sơ cấpdy

【Mục đích sử dụng】

Dành cho IVD. WT1 Thuốc thử kháng thể được dùng để nhận diện định tính WT1 bằng kính hiển vi trong các phần mô FFPE bằng hệ thống phát hiện hóa mô miễn dịch hệ thống.

【Nuyên lý】

WT1 là một yếu tố phiên mã được đặt tên theo Wilms' Tumor 1, một bệnh ác tính phôi thai của thận gây ra bởi các đột biến ở gen WT1. Nó đóng vai trò thiết yếu cho sự phát triển của hệ tiết niệu sinh dục. Các đột biến và sự rối loạn điều hòa biểu hiện của WT1 dẫn đến nhiều hội chứng khác nhau ảnh hưởng đến hệ tiết niệu sinh dục và các mô khác.Thêm kháng thể thứ nhất để gắn với kháng nguyên trên các lát cắt mô, sau đó sử dụng kháng thể thứ hai gắn nhãn HRP liên kết với kháng thể thứ nhất để tạo thành  kháng thể thứ hai- kháng thể nguyên phát- phức hợp kháng nguyên. Khi thêm dung dịch tạo màu DAB, HRP phản ứng với cơ chất enzyme để tạo ra sản phẩm phản ứng màu nâu không hòa tan, qua đó cho thấy gián tiếp sự tồn tại của kháng nguyên. 

【Thành phần chính】

Immunoglobulin, chất pha loãng kháng thể

【Bảo quản】

Bảo quản ở 2～8℃ trong 18 tháng。

【Yêu cầu mẫu】

Mô FFPE thường được cắt thành các lát mỏng khoảng 3～5μm bằng máy vi cắt mẫu (microtome). Các lát cắt này sau đó được đặt lên các tiêu bản kính được phủ chất kết dính mô.

【Quy trình】

1. Chuẩn bị mẫu：Tẩyparaffin các tiêu bản trong xylene Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ trong 5 phút; Chuyển các tiêu bản lần lượt qua dung dịch cồn 100%, 100%, 95%, 75% mỗi loại trong 2 phút lần lượt. Rửa tiêu bản bằng nước khử ion trong 30 giây.

2. Khóa: Khóa hoạt tính peroxidase nội sinh bằng cách ủ các tiêu bản trong dung dịch H₂O₂ 3% ở nhiệt độ phòng trong 5 phút để khóa hoạt tính peroxidase nội sinh. Rửa các tiêu bản bằng nước khử ion trong 30 giây.

3. Khơi cậy kháng nguyên: Đun nóng đệm khơi cậy kháng nguyên EDTA lên 100℃. Sau đó đặt các tiêu bản vào dung dịch đệm đang sôi và tiếp tục đun nóng trong 15~20 phút. Để nguội tự nhiên trong 30 phút. Rửa mẫu bằng dung dịch đệm rửa.

4. Ủ kháng thể nguyên phát: Làm ráo tiêu bản. Thêm kháng thể nguyên phát vào mô, ủ ở nhiệt độ phòng trong 30 phút. (sử dụng chất pha loãng kháng thể hoặc PBS làm đối chứng). Rửa các tiêu bản trong PBST 2 lần, mỗi lần 5 phút. Nếu kháng thể nguyên chất (đậm đặc), vui lòng pha loãng thành dạng RTU (sẵn sàng sử dụng) theo thông tin trên bao bì. 

5. Kháng thể thứ cấp: Để ráo các tiêu bản. Thêm kháng thể thứ cấp vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 20  phút. Rửa các tiêu bản trong PBST 2 lần, mỗi lần 5 phút.

6. DAB：Làm ráo nước trên các lam kính. Thêm DAB vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút. Rửa sạch các lam kính bằng nước khử ion.

7. Nhuộm Hematoxylin：Làm ráo nước trên các lam kính. Thêm Hematoxylin vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút. Rửa sạch các lam kính bằng nước. Sử dụng dung dịch axit để phân biệt. Rửa sạch các lam kính bằng nước.

8.Mất nước：Khử nước các lam kính trong 75%, 95%, 100% rượu cho 2 phút. Làm khô các tiêu bản. Đậy mô đã nhuộm bằng một lamen sử dụng keo gắn tiêu bản.

【Vị trí dương tính】

1. Vị trí dương tính: nhân tế bào.

2. Chứng dương tính: u Wilms.

【Thận trọng】

1. Vui lòng đọc kỹ hướng dẫn và làm quen với tất cả các thành phần của bộ kit trước khi sử dụng, tuân thủ nghiêm ngặt hướng dẫn trong quá trình vận hành.

2. KHÔNG sử dụng bộ kit hoặc bất kỳ thành phần nào của bộ kit sau hạn sử dụng.

3. Chỉ các chuyên gia được đào tạo mới có thể sử dụng bộ kit này. Vui lòng mặc áo blouse phòng thí nghiệm phù hợp và mang găng tay dùng một lần khi xử lý các thuốc thử.

4. Tránh để da, mắt và màng nhầy tiếp xúc với các hóa chất.

5. KHÔNG hút pipet bằng miệng.

6. Các thuốc thử chưa sử dụng, bộ kit đã qua sử dụng và chất thải phải được xử lý theo quy định của địa phương.

【Nhà sản xuất】

Tên công ty: Xiamen Talent Biomedical Technology Co.,Ltd

Địa chỉ: Không. Tầng 3 và 4, Tòa nhà B10, Số 2068 Đường Wengjiao Tây, Khu Công nghệ Sinh học và Y tế, Quận Hải Thương, Thành phố Hạ Môn, 36100 Trung Quốc

Điện thoại: +86 592 6315755            

Email: tlsw@talentbiomedical.com                

Trang web: www.talentbiomedical.com

【Ký hiệu】