Thuốc thử kháng thể PCNA dùng cho hóa mô miễn dịch

【Tên sản phẩm】

Kháng thể IHC -- PCNA

【Quy cách đóng gói】

【Mục đích sử dụng】

Dành cho IVD. Thuốc thử kháng thể PCNA được dùng để định tính PCNA bằng kính hiển vi trong các lát cắt mô FFPE bằng hệ thống phát hiện hóa mô miễn dịch.

【Principle】

PCNA (Kháng thể hạt nhân tế bào tăng sinh), đóng vai trò trung tâm trong việc điều phối sự liên kết của các nhân tố sao chép trong quá trình sao chép DNA cũng như trong việc nhận diện và sửa chữa tổn thương DNA. Kháng thể PCNA phát hiện các tế bào đang tăng sinh ở cả tế bào bình thường và tế bào khối u. Chỉ số gắn nhãn Anti-PCNA đã được chứng minh là có liên quan đến tiên lượng khối u. Thêm kháng thể nguyên phát để liên kết kháng thể trên các lát cắt mô, sau đó sử dụng kháng thể thứ phát gắn nhãn HRP liên kết với kháng thể nguyên phát để tạo thành phức hợp kháng thể thứ phát - kháng thể nguyên phát - kháng thể. Khi thêm dung dịch tạo màu DAB, HRP phản ứng với cơ chất của enzyme để tạo ra sản phẩm phản ứng màu nâu không hòa tan, qua đó cho thấy sự tồn tại của kháng thể một cách gián tiếp.

【Thành phần chính】

Iimmunoglobulin, chất pha loãng kháng thể

【Lưu trữ】

Bảo quản ở 2～8℃ cho 18 tháng。

【Yêu cầu về mẫu】

Các mô FFPE thường được cắt thành các lát mỏng khoảng 3～5μm bằng một máy cắt vi phẫu. Các lát cắt này sau đó được gắn lên các phiến kính được phủ chất kết dính mô.

【Quy trình】

1. Chuẩn bị mẫu：Tẩy parafin các tiêu bản trong xylene Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ trong 5 phút；Chuyển tiêu bản lần lượt qua các dung dịch cồn 100%, 100%, 95%, 75% rượu trong 2 phútxe bán tải lần lượt. Rửa tiêu bản bằng nước khử ion trong 30 giây.

2. Khóa：Khóa hoạt tính peroxidase nội sinh bằng cách ủ các lát cắt trong 3% H₂O₂ dung dịch ở nhiệt độ phòng trong 5 phútphút để ức chế hoạt tính peroxidase nội sinh. Rửa các lam kính bằng nước cất khử ion trong 30 giây.

3. Phục hồi kháng nguyên：Làm nóng đệm khôi phục kháng nguyên EDTA đến 100℃. Sau đó, đặt các tiêu bản vào dung dịch đệm đã sôi và tiếp tục gia nhiệt trong 15～20 phút. Để nguội tự nhiên trong 30 phút. Rửa mẫu bằng dung dịch đệm rửa.

4. Ủ kháng thể nguyên phát: Làm ráo các tiêu bản. Thêm kháng thể nguyên phát vào mô, ủ ở nhiệt độ phòng trong 30 phút. (sử dụng chất pha loãng kháng thể hoặc PBS làm đối chứng). Rửa các tiêu bản trong PBST 2 lần, mỗi lần 5 phút. Nếu kháng thể nguyên phát là dạng đậm đặc, vui lòng pha loãng thành RTU (sẵn sàng sử dụng) theo thông tin trên bao bì. 

5. Thứ haithứ cấp kháng thể: Làm ráo các tiêu bản. Thêm kháng thể thứ cấp vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 20  phút. Rửa các tiêu bản trong PBST 2 lần, mỗi lần 5 phút.

6. DAB: Làm ráo các tiêu bản. Thêm DAB vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút. Rửa các tiêu bản bằng nước khử ion.

7. Nhuộm Hematoxylin: Làm ráo các tiêu bản. Thêm Hematoxylin vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút. Rửa các tiêu bản bằng nước. Dùng dung dịch axit để phân biệt. Rửa các tiêu bản bằng nước.

8. Khử nước：Khử nước các tiêu bản trong cồn 75%, 95%, 100% trong 2 phút. Làm khô các tiêu bản. Đậy mô đã nhuộm bằng lamen sử dụng keo gắn lamen.

【Vị trí dương tính】

1. Vị trí dương tính: nhân.

2. Đối chứng dương: ung thư vú.

【Thận trọng】

1. Vui lòng đọc kỹ hướng dẫn và làm quen với tất cả các thành phần của bộ kit trước khi sử dụng, tuân thủ nghiêm ngặt hướng dẫn trong quá trình thao tác.

2. KHÔNG sử dụng bộ kit hoặc bất kỳ thành phần nào của bộ kit sau khi hết hạn.

3. Chỉ những chuyên gia đã được đào tạo mới được sử dụng bộ kit này. Vui lòng mặc áo choàng thí nghiệm thích hợp và đeo găng tay dùng một lần khi xử lý các thuốc thử.

4. Tránh để da, mắt và màng nhầy tiếp xúc với các hóa chất.

5. KHÔNG hút bằng miệng.

6. Các thuốc thử chưa sử dụng, bộ kit đã qua sử dụng và chất thải phải được xử lý theo quy định của địa phương.

【Nhà sản xuất】

Company Name: Xiamen Talent Biomedical Technology Co.,Ltd

Address: The 3rd and 4th Floors, Building B10, No. 2068 Wengjiao West Road, BioMedical Park, Haicang District, Xiamen City, 361000 China

Tel: +86 592 6315755            

E-mail: talent1@talentbiomedical.com                

Website: www.talentbiomedical.com

【Ký hiệu】