Thuốc thử kháng thể EGFR dùng cho hóa mô miễn dịch

 【Tên sản phẩm】

Thuốc thử kháng thể EGFR——Kháng thể sơ cấp

【Mục đích sử dụng】

Dành cho IVD.Thuốc thử kháng thể EGFR được dùng để định tínhEGFR bằng kính hiển vi trong các lát cắt mô FFPE sử dụng hệ thống phát hiện hóa mô miễn dịchhệ thống.

【Nguyên lý】

EGFR là một thành viên của họ thụ thể yếu tố tăng trưởng loại I , bao gồm một miền chức năng ngoại bào có thể liên kết với yếu tố tăng trưởng biểu bì, một miền xuyên màng ngắn và một miền nội bào có hoạt tính tyrosine kinase. EGFR được biểu hiện ở nhiều mô bình thường, đặc biệt là ở lớp đáy của biểu mô phân tầng và biểu mô vảy. Sự biểu hiện quá mức của EGFR được tìm thấy ở nhiều loại mô khối u, chẳng hạn như khối u vú, bàng quang, phổi, dạ dày, thực quản và đầu cổ. Thêm kháng thể sơ cấp để liên kết kháng nguyên  trên lát cắt mô, và sau đó sử dụng kháng thể thứ cấp gắn nhãn HRP liên kết với kháng thể sơ cấp để tạo thành kháng thể thứ cấp- kháng thể nguyên phát- phức hợp kháng nguyên. Khi dung dịch tạo màu DAB được thêm vào, HRP phản ứng với cơ chất enzyme để tạo ra sản phẩm phản ứng màu nâu không hòa tan, qua đó gián tiếp chỉ ra sự tồn tại của kháng nguyên. 

【Thành phần chính】

Immunoglobulin, dung dịch pha loãng kháng thể

【Bảo quản】

Bảo quản ở 2～8℃ trong 18 tháng。

【Yêu cầu mẫu】

Mô FFPE thường được cắt thành các lát mỏng khoảng 3～5μm bằng máy cắt vi thể. Các lát cắt này sau đó được gắn lên các phiến kính được phủ chất kết dính mô.

【Quy trình】

1. Chuẩn bị mẫu：Khử parafin các tiêu bản trong xylene Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ trong 5 phút；Chuyển lam kính lần lượt qua các dung dịch cồn 100%, 100%, 95%, 75% trong thời gian tương ứng là 2 phút. Rửa lam kính bằng nước khử ion trong 30 giây.

2. Phong bế：Phong bế hoạt tính peroxidase nội sinh bằng cách ủ các lát cắt trong H₂O₂ dung dịch ở nhiệt độ phòng trong 5 tối thiểuphútđể chặn hoạt động peroxidase nội sinh. Rửa các tiêu bản bằng nước khử ion trong 30 giây.

3. Phục hồi kháng nguyên：Đun nóng đệm bộc lộ kháng nguyên EDTA đến 100℃. Sau đó đặt các lam kính vào dung dịch đệm đã sôi và tiếp tục đun nóng trong 15～20 phút. Để nguội tự nhiên trong 30 phút. Rửa mẫu bằng đệm rửa.

4. Ủ kháng thể thứ cấp: Làm ráo nước trên lam kính. Thêm kháng thể thứ cấp vào mô, ủ ở nhiệt độ phòng trong 30 phút. (sử dụng dung dịch pha loãng kháng thể hoặc PBS làm đối chứng). Rửa các tiêu bản trong PBST trong 2 lần, mỗi lần 5 phút. Nếu kháng thể sơ cấp là dạng đậm đặc, vui lòng pha loãng thành dạng RTU (sẵn sàng sử dụng) theo thông tin trên bao bì. 

5. Kháng thể thứ cấp: Để ráo các tiêu bản. Thêm kháng thể thứ cấp vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 20  phút. Rửa các tiêu bản trong PBST trong 2 lần, mỗi lần 5 phút.

6. DAB：Để ráo các tiêu bản. Thêm DAB vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút. Rửa lại tiêu bản bằng nước khử ion.

7. Nhuộm Hematoxylin：Để ráo các tiêu bản. Thêm Hematoxylin vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút. Rửa tiêu bản bằng nước. Sử dụng dung dịch axit để phân biệt. Rửa tiêu bản bằng nước.

8. Khử nước：Khử nước các tiêu bản trong cồn 75%, 95%, 100% trong 2 phút. Làm khô các tiêu bản. Đậy mô đã nhuộm bằng lamen sử dụng keo gắn lamen.

【Vị trí định lượng dương tính】

1. Vị trí định lượng dương tính: màng tế bào/tế bào chất.

2. Chứngdương tính: mô nhau thai.

【Thận trọng】

1. Vui lòng đọc kỹ hướng dẫn và làm quen với tất cả các thành phần của bộ kit trước khi sử dụng, tuân thủ nghiêm ngặt hướng dẫn trong quá trình vận hành.

2. KHÔNG sử dụng bộ kit hoặc bất kỳ thành phần nào của bộ kit sau khi hết hạn.

3. Chỉ những chuyên gia được đào tạo mới có thể sử dụng bộ kit này. Vui lòng mặc áo choàng phòng thí nghiệm phù hợp và đeo găng tay dùng một lần khi xử lý các thuốc thử.

4. Tránh để da, mắt và màng nhầy tiếp xúc với các hóa chất.

5. KHÔNG hút pipet bằng miệng.

6. Các thuốc thử không sử dụng, bộ kit đã qua sử dụng và chất thải phải được xử lý theo quy định của địa phương.

【Nhàsản xuất】

Company Name: Xiamen Talent Biomedical Technology Co.,Ltd

Address: Số.3rd and 4th Floors , Building B10, No. 2068 Wengjiao Road West, BioMedical Park, Haicang District, Xiamen City, 36100 China

Tel: +86 592 6315755            

E-mail: tlsw@talentbiomedical.com                

Trang web: www.talentbiomedical.com

【Ký hiệu】