Thuốc thử kháng thể DOG1 dùng cho hóa mô miễn dịch

【Tên sản phẩm】

Thuốc thử kháng thể DOG1——Kháng thể sơ cấpdy

【Mục đích sử dụng】

Dành cho IVD. Thuốc thử kháng thể DOG1 được sử dụng để xác định định tính DOG1 bằng kính hiển vi trong các lát cắt mô FFPE bằng hệ thống phát hiện hóa mô miễn dịch hệ thống.

【Nguyên lý】

Gen DOG1 nằm trên nhiễm sắc thể 11q13 và cấu trúc protein của nó có tám vùng chức năng xuyên màng. Các nghiên cứu đã xác nhận rằng protein DOG1 được biểu hiện chọn lọc trong GIST, và DOG1 là một dấu ấn nhạy cảm và đặc hiệu hơn của GIST so với một dấu ấn GIST khác là CD117. Thêm kháng thể sơ cấp để liên kết kháng nguyên trên các lát cắt mô , sau đó sử dụng kháng thể thứ cấp dán nhãn HRP liên kết với kháng thể sơ cấp để tạo thành  kháng thể thứ cấp- kháng thể sơ cấp- kháng thể sơ cấp- phức hợp kháng nguyên. Khi thêm dung dịch tạo màu DAB, HRP phản ứng với cơ chất của enzyme để tạo ra sản phẩm phản ứng màu nâu không hòa tan, từ đó chỉ gián tiếp sự tồn tại của kháng nguyên. 

【Thành phần chính】

Immunoglobulin, dung dịch pha loãng kháng thể

【Bảo quản】

Bảo quản ở 2～8℃ trong 18 tháng。

【Yêu cầu về mẫu】

Các mô FFPE thường được cắt thành các lát dày từ 3～5μm bằng máy cắt vi thể. Các lát cắt này sau đó được gắn lên các lam kính được phủ chất kết dính mô.

【Quy trình】

1. Chuẩn bị mẫu：Tẩy parafin các lam kính trong xylen Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ trong 5 phútphút；Chuyển các tiêu bản lần lượt qua các dung dịch cồn 100%, 100%, 95%, 75% mỗi loại trong 2 phút Rửa các tiêu bản bằng nước khử khoáng trong 30 giây.

2. Khóa：Khóa hoạt tính peroxidase nội sinh bằng cách ủ các tiêu bản trong dung dịch H₂O₂ 3% ở nhiệt độ phòng trong 5 phút để chặn hoạt tính peroxidase nội sinh. Rửa các tiêu bản bằng nước khử ion trong 30 giây.

3. Phục hồi kháng nguyên:Đun nóng dung dịch đệm phục hồi kháng nguyên EDTA đến 100℃. Sau đó, đặt các tiêu bản vào dung dịch đệm đã đun sôi và tiếp tục gia nhiệt trong 15～20 phút. Để nguội tự nhiên trong 30 phút. Rửa mẫu bằng dung dịch đệm rửa.

4. Ủ kháng thể chính: Để ráo các tiêu bản. Thêm kháng thể chính vào mô, ủ ở nhiệt độ phòng trong 30 phút. (sử dụng dung dịch pha loãng kháng thể hoặc PBS làm đối chứng). Rửa các tiêu bản trong PBST 2 lần, mỗi lần 5 phút. Nếu kháng thể nguyên chất (đậm đặc), vui lòng pha loãng thành dạng RTU (sẵn sàng sử dụng) theo thông tin trên bao bì. 

5. Kháng thể thứ cấp: Để ráo các tiêu bản. Thêm kháng thể thứ cấp lên mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 20 phút . Rửa các tiêu bản trong PBST 2 lần, mỗi lần 5 phút.

6. DAB：Để ráo các tiêu bản. Thêm DAB vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút. Rửa tiêu bản bằng nước khử ion.

7. Nhuộm Hematoxylin：Để ráo các tiêu bản. Thêm Hematoxylin vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút. Rửa các tiêu bản bằng nước. Sử dụng dung dịch axit để phân biệt. Rửa các tiêu bản bằng nước.

8. Mất nước：Mất nước các tiêu bản trong cồn 75%, 95%, 100% trong 2 phútphút. Làm khô các phiến kính. Đậy mô nhuộm bằng lamen sử dụng dung dịch gắn mẫu.

【Vị trí dương tính】

1. Vị trí dương tính: tế bào chất/màng.

2. Chứng dương tính: GIST.

【Biện pháp phòng ngừa】

1. Vui lòng đọc kỹ hướng dẫn và làm quen với tất cả các thành phần của bộ kit trước khi sử dụng, tuân thủ nghiêm ngặt hướng dẫn trong quá trình vận hành.

2. KHÔNG sử dụng bộ kit hoặc bất kỳ thành phần nào của bộ kit sau hạn sử dụng.

3. Chỉ những chuyên gia được đào tạo mới có thể sử dụng bộ kit này. Vui lòng mặc áo blouse thích hợp và đeo găng tay dùng một lần khi xử lý các thuốc thử.

4. Tránh để da, mắt và màng nhầy tiếp xúc với các hóa chất.

5. KHÔNG dùng miệng hút pipet.

6. Các thuốc thử không sử dụng, bộ kit đã qua sử dụng và chất thải phải được xử lý theo quy định của địa phương.

【Nhà sản xuất】

Company Name: Xiamen Talent Biomedical Technology Co.,Ltd

Address: Không. Tầng 3 và 4, Tòa nhà B10, số 2068 Phố Wengjiao Tây, Khu công nghiệp Y sinh, Quận Hải Thương, Thành phố Hạ Môn, 36100 Trung Quốc

Điện thoại: +86 592 6315755            

Thư điện tử: tlsw@talentbiomedical.com                

Trang web: www.talentbiomedical.com

【Biểu tượng】