Thuốc thử kháng thể CD146 dùng cho hóa mô miễn dịch

【Tên sản phẩm】

Kháng thể IHC --CD146

【Quy cách đóng gói】

【Mục đích sử dụng】

Dùng cho chẩn đoán in vitro (IVD). CD146 Thuốc thử kháng thể được sử dụng để nhận diện định tính CD146 bằng kính hiển vi trên các lát cắt mô vùi paraffin cố định bằng formin (FFPE) bằng hệ thống phát hiện hóa mô miễn dịch hệ thống.

【Nguyên lý】

CD146, còn được gọi là phân tử kết dính tế bào u hắc tố (MCAM hoặc Mel-CAM), MUC18, S-Endo1 và kháng nguyên A32, là một glycoprotein xuyên màng được biểu hiện trên các tế bào nội mô và nằm ở vị trí nối gian bào, nơi nó đóng vai trò trong sự kết dính tế bào và sự gắn kết của lớp đơn tế bào nội mô. Thêm kháng thể chính để liên kết kháng nguyên trên các lát cắt mô, và sau đó sử dụng kháng thể phụ gắn nhãn HRP liên kết với kháng thể chính để tạo thành phức hợp kháng  thể phụ-kháng thể chính-kháng nguyên. Khi dung dịch tạo màu DAB được thêm vào, HRP phản ứng với cơ chất của enzyme để tạo ra sản phẩm phản ứng màu nâu không hòa tan, qua đó cho biết gián tiếp sự tồn tại của kháng nguyên. 

【Thành phần chính】

Iimmunoglobulin, dung dịch pha loãng kháng thể

【Bảo quản】

Bảo quản ở 2～8℃ trong 18 tháng。

【Yêu cầu mẫu】

Mô FFPE thường được cắt thành các lát mỏng khoảng 3～5μm bằng máy cắt vi thể. Các lát cắt này sau đó được đặt lên các lam kính được phủ chất kết dính mô.

【Quy trình】

1. Chuẩn bị mẫu：Khử parafin các tiêu bản trong xylene Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ trong 5 phút；Chuyển tiêu bản lần lượt qua các dung dịch 100%, 100%, 95%, 75% alcohol trong 2 phútlần lượt. Rửa các tiêu bản bằng nước khử ion trong 30 giây.

2. Chặn：Chặn hoạt tính peroxidase nội sinh bằng cách ủ các lát cắt trong dung dịch H₂O₂ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút để chặn hoạt tính peroxidase nội sinh. Rửa các tiêu bản bằng nước khử ion trong 30 giây.

3. Phục hồi kháng nguyên：Đun nóng đệm hồi phục kháng nguyên EDTA đến 100℃. Sau đó đặt các tiêu bản vào dung dịch đệm đang sôi và tiếp tục đun nóng trong 15～20 phút. Để nguội tự nhiên trong 30 phút. Rửa mẫu bằng đệm rửa.

4. Ủ kháng thể nguyên phát: Để ráo các tiêu bản. Thêm kháng thể nguyên phát vào mô, ủ ở nhiệt độ phòng trong 30 phút. (sử dụng dung dịch pha loãng kháng thể hoặc PBS làm đối chứng). Rửa các tiêu bản trong PBST 2 lần, mỗi lần 5 phút. Nếu kháng thể nguyên phát ở dạng đậm đặc, vui lòng pha loãng thành RTU (sẵn sàng sử dụng) theo thông tin trên bao bì. 

5. Thứ haikháng thể thứ cấp: Làm ráo các tiêu bản. Thêm kháng thể thứ cấp vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 20  phút. Rửa các tiêu bản trong PBST 2 lần, mỗi lần 5 phút.

6. DAB： Làm ráo các tiêu bản. Thêm DAB vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút. Rửa các tiêu bản bằng nước khử ion.

7. Nhuộm Hematoxylin： Làm ráo các tiêu bản. Thêm Hematoxylin vào mô và ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút. Rửa các tiêu bản bằng nước. Sử dụng dung dịch axit để phân biệt. Rửa các tiêu bản bằng nước.

8. Làm mất nước： Làm mất nước các tiêu bản trong cồn 75%, 95%, 100% trong 2 phút. Làm khô các tiêu bản. Đậy mô đã nhuộm bằng lamen sử dụng môi trường gắn mẫu.

【Vị trí dương tính】

1. Vị trí dương tính: tế bào chất.

2. Chứngdương tính: nhau thai.

【Thận trọng】

1. Vui lòng đọc kỹ hướng dẫn và làm quen với tất cả các thành phần của bộ kit trước khi sử dụng, tuân thủ nghiêm ngặt hướng dẫn trong quá trình vận hành.

2. KHÔNG sử dụng bộ kit hoặc bất kỳ thành phần nào của bộ kit sau ngày hết hạn.

3. Chỉ các chuyên gia đã được đào tạo mới được sử dụng bộ kit này. Vui lòng mặc áo blouse phù hợp và đeo găng tay dùng một lần khi xử lý các thuốc thử.

4. Tránh để da, mắt và màng nhầy tiếp xúc với các hóa chất.

5. KHÔNG hút pipet bằng miệng.

6. Các thuốc thử chưa sử dụng, bộ kit đã qua sử dụng và chất thải phải được xử lý theo quy định của địa phương.

【Nhàsản xuất】

Tên công ty: Xiamen Talent Biomedical Technology Co.,Ltd

Địa chỉ: Tầng. 3 và 4, Tòa nhà B10, số 2068 Đường Wengjiao Tây, Công viên Y sinh, Quận Hải Thương, Thành phố Hạ Môn, 36100 Trung Quốc

Điện thoại: +86 592 6315755            

E-mail: tlsw@talentbiomedical.com                

Trang web: www.talentbiomedical.com

【Ký hiệu】